本試劑盒采用探針法單重實(shí)時熒光PCR方法檢測豬全血、血清、精液、大腦海馬背側(cè)皮層、中腦、腦橋、三叉神經(jīng)節(jié)、肺臟、淋巴結(jié)、鼻拭子及細(xì)胞培養(yǎng)物等樣品中豬偽狂犬病毒(PRV)的DNA，適用于豬偽狂犬流行病毒的檢測。AD-003-0為普通探針法檢測試劑盒；AD-003-1為防污染體系檢測試劑盒，添加dUTP和UNG酶可有效減少氣溶膠等的污染，降低假陽性風(fēng)險。

將以上配制的反應(yīng)體系充分混勻后，分裝每個反應(yīng)管中各18 μL。

分別取2 μL 模板DNA，加入相應(yīng)反應(yīng)管中，混勻并作好標(biāo)記。在熒光PCR 擴(kuò)增儀上進(jìn)行以下反應(yīng)：95 ℃ 2 min；循環(huán) 95 ℃ 10 s，60 ℃ 35 s，共40 次，每次循環(huán)的第二步（60℃ 35 s）收集熒光信號（報告基團(tuán)“Cy5”，淬滅基團(tuán)“None”）。防污染體系在預(yù)變性步驟（95 ℃ 2 min）之前進(jìn)行消化步驟50 ℃ 5 min。