目錄號(hào):AD-004-0/AD-004-1
單價(jià):1600元/1900元
本試劑盒采用探針?lè)▎沃貙?shí)時(shí)熒光RT-PCR方法檢測(cè)豬血清、淋巴結(jié)、脾臟、肺臟、扁桃體、肺灌洗液、口腔拭子及細(xì)胞培養(yǎng)物等樣品中豬藍(lán)耳病毒(即豬繁殖與呼吸綜合征病毒,PRRSV)的RNA,適用于豬藍(lán)耳病毒的檢測(cè)。AD-004-0為普通探針?lè)ǎ籄D-004-1為防污染體系,添加dUTP和溫度敏感型UNG酶可有效減少氣溶膠等的污染,降低假陽(yáng)性風(fēng)險(xiǎn)。
| 組成 | 100頭份 | 貯藏條件 |
| 反轉(zhuǎn)錄酶混合液 | 110 μL | -20℃ |
| 陰性對(duì)照(無(wú)核酸酶水) | 1 mL | |
| 陽(yáng)性對(duì)照 | 20 μL | |
| PCR 反應(yīng)液 | 900 μL | |
| 熒光探針 | 220 μL | |
| 說(shuō)明書 | 1 份 |
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試劑 |
體系 |
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無(wú)菌無(wú)核酸酶水 |
7×(N+1)μL |
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反轉(zhuǎn)錄酶混合液 |
1×(N+1)μL |
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PCR 反應(yīng)液 |
8×(N+1)μL |
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引物、熒光探針混合液 |
2×(N+1)μL |
將以上配制的反應(yīng)體系充分混勻后,分裝每個(gè)反應(yīng)管中各18 μL。
分別取2 μL 模板DNA,加入相應(yīng)反應(yīng)管中,混勻并作好標(biāo)記。在熒光PCR 擴(kuò)增儀上進(jìn)行以下反應(yīng):反轉(zhuǎn)錄50 ℃ 5 min,預(yù)變性95 ℃ 2 min,循環(huán) 95 ℃ 10 s,60 ℃ 35 s,共40 次,每次循環(huán)的第二步(60 ℃ 35 s)收集熒光信號(hào)(報(bào)告基團(tuán)“ROX”,淬滅基團(tuán)“None”)。防污染體系在反轉(zhuǎn)錄步驟(50 ℃ 5 min)之前加入消化步驟25 ℃ 5 min。

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