本試劑盒采用探針法多重實時熒光PCR方法檢測豬全血、血清、淋巴結、脾臟、腎臟、扁桃體、骨髓及口鼻拭子等樣品中非洲豬瘟病毒(ASFV)的DNA,適用于非洲豬瘟流行野毒及MGF360-505R缺失毒和CD2V與MGF360-505R聯合缺失毒的檢測。
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組成 |
100頭份 |
貯藏條件 |
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陰性對照(無核酸酶水) |
1 mL |
-20℃ |
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陽性對照 |
20 μL |
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PCR 反應液 |
900 μL |
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熒光探針 |
650 μL |
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說明書 |
1 份 |
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試劑 |
體系 |
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無菌無核酸酶水 |
4×(N+1)μL |
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PCR 反應液 |
8×(N+1)μL |
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引物、熒光探針混合液 |
6×(N+1)μL |
將以上配制的反應體系充分混勻后,分裝每個反應管中各18 μL。
分別取2 μL 模板DNA,加入相應反應管中,混勻并作好標記。在熒光PCR 擴增儀上進行以下反應:95 ℃ 2 min;循環 95 ℃ 10 s,58 ℃ 35 s,共40 次,每次循環的第二步(58 ℃ 35 s)收集熒光信號。(報告基團“FAM、HEX、ROX”,淬滅基團“None”)防污染體系在預變性步驟(95 ℃ 2 min)之前進行消化步驟50 ℃ 5 min。

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