目錄號:AD-013-1
單價(jià):2600元
本試劑盒采用探針法多重實(shí)時(shí)熒光RT-PCR方法檢測母豬乳汁、排泄物、肛門拭子及細(xì)胞培養(yǎng)物等樣品中豬流行性腹瀉病毒(PEDV)、豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)和豬輪狀病毒(PRoV)的RNA,適用于豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒和豬輪狀病毒的檢測。
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組成 |
100頭份 |
貯藏條件 |
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陰性對照(ddH2O) |
1 mL |
-20℃ |
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陽性對照(PTC) |
20 μL |
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20×反轉(zhuǎn)錄酶混合液(酶Mix) |
110 μL |
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2.5×PTP qPCR 反應(yīng)液*1(qMix) |
850 μL |
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2.5×PTP引物及探針混合液*2(引物Mix) |
850 μL |
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說明書 |
1 份 |
*1:PTP為豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒和豬輪狀病毒英文簡稱PEDV、TGEV、PRoV首字母縮略而來。
*2:該引物及探針混合液中包括豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒、豬輪狀病毒和豬源內(nèi)質(zhì)控的引物、探針等,該混合液使用及保存時(shí)請盡量避光。
試劑
體系
20×反轉(zhuǎn)錄酶混合液
1×(N+1)μL
2.5×PTP qPCR 反應(yīng)液
8×(N+1)μL
2.5×PTP引物及探針混合液
8×(N+1)μL
§ 將以上配制的反應(yīng)體系充分混勻后,分裝每個(gè)反應(yīng)管中各17 μL。取3 μL 模板DNA/RNA,加入相應(yīng)反應(yīng)管中,混勻并作好標(biāo)記。
§ 在熒光PCR 擴(kuò)增儀上進(jìn)行以下反應(yīng):UNG酶消化25 ℃ 5 min,反轉(zhuǎn)錄55 ℃ 5 min,預(yù)變性95 ℃ 2 min;循環(huán) 95 ℃ 5 s,60 ℃ 30 s,共40 次,每次循環(huán)的第二步(60 ℃ 30 s)收集熒光信號(報(bào)告基團(tuán)“FAM、HEX、ROX、Cy5”,淬滅基團(tuán)“None”)。

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